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B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞
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| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞正在出售的產(chǎn)品：人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML GP120 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC)人細(xì)胞裂解液 NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形細(xì)胞樣；上皮樣細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 小鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 梭形細(xì)胞樣；上皮樣細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
注意事項(xiàng) B16系列細(xì)胞，使用DMEM培養(yǎng)時(shí)可能出現(xiàn)黑色素快速積累，細(xì)胞不增殖或死亡的情況，該細(xì)胞正常擴(kuò)增凍存請使用RPMI-1640完培，若您需要進(jìn)行分泌黑色素等后續(xù)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)檢測試劑盒 ，英文名： sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit
Mouse ierleukin -5 (IL-5) ELISA Kit 小鼠白介素-5(IL-5)檢測試劑盒
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CLIAKitforINH-AELISAKit大鼠抑制素A
通用型谷同酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
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NTRK2重組人 TrkB / NTRK2 蛋白 Protein
Ⅱ(F2)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor II (F2)
CGA重組人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 蛋白
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
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B16-F10小鼠黑色素瘤細(xì)胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neurotensin () ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素()檢測試劑盒
Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit 人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAb檢測試劑盒人抗乙型肝病毒e抗體(HBeAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物0脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
humanversican/PG-M/PG-350,VSELISAKit人多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白細(xì)胞介素25（IL-25）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白三烯E4（LTE4）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
