RIN-m5f大鼠β胰島素瘤細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞是大鼠胰島細(xì)胞RIN-m的克隆，分泌胰島素及L型多巴脫羧酶，不產(chǎn)生生長激素抑制激素。

細(xì)胞特性

1）來源：大鼠胰島

2）形態(tài)：貼壁生長，上皮樣

3）含量：>1x106 個/mL

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒

Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)檢測試劑盒

HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

Human5-Nucleotidase,5-檢測試劑盒人5核苷酸酶(5-)檢測試劑盒

真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次

Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)檢測試劑盒

BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RIN-m5f大鼠β胰島素瘤細(xì)胞植物茉莉酸甲酯(MeJA)ELISA 試劑盒

Human ai nucleolus aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核仁抗體(ANA)檢測試劑盒

Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaFABP(Humanadipocytefattyacid-bindingprotein)ELISAKit人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性熒光定量檢測試劑盒20次

MouseSuperOxidaseDimase,SODELISAKit小鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒

脂肪酶（LPS）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

醇脫氫酶（ADH）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

脂氧合酶（LOX）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

?；D(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒   可見分光光度法   10管/9樣

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。