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人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-luc-EGFP
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| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-luc-EGFP正在出售的產(chǎn)品：非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 IL5 Others Mouse 小鼠 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish)
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-luc-EGFP
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱；SK-HEP-1-LUC-EGFP；人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白；人肝癌細(xì)胞-LUC-EGFP
種屬來源；人
年齡性別；男，52歲
組織來源；肝臟
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
puro藥篩濃度；SK-HEP-1-LUC-EGFP細(xì)胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml，培養(yǎng)過程中建議使用0.5ug/ml濃度puro維持
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
參考資料(來源文獻(xiàn))
SK-HEP-1細(xì)胞已被鑒定為內(nèi)皮來源。SK-HEP-1細(xì)胞為異倍體女性人(XX)，染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。在裸鼠中，SK-HEP-1細(xì)胞能形成與肝癌相一致的大細(xì)胞癌。Luciferase SK-HEP-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持?？捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實(shí)驗(yàn)。SK-HEP-1細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc和EGFP基因。 |
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測試劑盒 ，英文名： 6-keto-PGF1a ELISA Kit
Mouse maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/G 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/G
Mouseglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit 小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素
通用型直鏈淀粉比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKit大鼠受體
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CLMP Protein Human 重組人 ASAM / CLMP 蛋白
TFF3 (trefoil factor3 0.5mgTFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)
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Spike中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽) Protein
CLMP Protein Human 重組人 ASAM / CLMP 蛋白
IL18R1重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 Protein
人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-luc-EGFP小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒
Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP檢測試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠檢測試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠乙酰檢測試劑盒 小鼠乙酰試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠乙酰試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠乙酰試劑盒、小鼠乙酰檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠單胺氧化酶檢測試劑盒 小鼠單胺氧化酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠單胺氧化酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠單胺氧化酶試劑盒、小鼠單胺氧化酶檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子前列腺素E2檢測試劑盒 兔子前列腺素E2試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子前列腺素E2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子前列腺素E2試劑盒、兔子前列腺素E2 檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
