MHCC-97H人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱(chēng)：MHCC-97H；人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：

組織來(lái)源：肝臟

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：MHCC-97H細(xì)胞來(lái)源于中山醫(yī)院，用人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H接種裸鼠，進(jìn)行3次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細(xì)胞系。

生物安全等級(jí)：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：

培養(yǎng)基：89%DMEM+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： THBS1 ELISA Kit

Mouse coisol (Coisol) ELISA Kit 小鼠(Coisol)檢測(cè)試劑盒

MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanchemerinELISAKit人chemerin

細(xì)胞CHK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitsIgA大鼠分泌型免疫球蛋白A

CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein

CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細(xì)胞趨化蛋白5抗原

UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白

CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細(xì)胞趨化蛋白5抗原

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白

CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein

CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein

MHCC-97H人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)檢測(cè)試劑盒

Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2檢測(cè)試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次

HumanSurfactaProteinA，SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素6(IL-6)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素12(IL-12/P70)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。