細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

ATDC5小鼠胚胎瘤細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞數(shù)量：1*10^6

細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（2ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）

培養(yǎng)基：準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。換液頻率：每周2-3次

培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

細(xì)胞凍存：液氮凍存（90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配）

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽

CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF10A Protein Human 重組人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽

THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein

CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白

TNFRSF10A Protein Human 重組人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

小鼠遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測試劑盒 96T/48T

Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)檢測試劑盒

HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人著絲粒蛋白B(CENP-B)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKL檢測試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)20次

MouseBigEndothelin,BigETELISAKit小鼠大內(nèi)皮素(BigET)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

ATDC5小鼠胚胎瘤細(xì)胞小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠轉(zhuǎn)酶/谷轉(zhuǎn)酶(ALT/GPT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測試劑盒 ，英文名： ELA2 ELISA Kit

Mouse soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒

MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 小鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit人溶酶體相關(guān)膜蛋白2

B1比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitDes大鼠結(jié)蛋白