細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

Z-138人套細(xì)胞淋巴瘤

商品屬性

商品介紹

種屬來(lái)源：人

性別年齡：男性，70歲

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件：IMDM + 10% 馬血清37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:5到1：15傳代, 1天傳1代

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白

CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein

CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein

CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)

IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白

小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)檢測(cè)試劑盒

Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1檢測(cè)試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10次

Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Z-138人套細(xì)胞淋巴瘤小鼠白介素23(IL-23)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素2(IL-2)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠白三烯B4(LTB4)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit

Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)  進(jìn)口分裝

CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素

通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitADP大鼠脂聯(lián)素