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產(chǎn)品描述：
人食管上皮細(xì)胞提取物【Human Esophageal: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives】
     人食管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)人食管上皮細(xì)胞提取物是從人原代食管上皮細(xì)胞提取的，人原代食管上皮細(xì)胞從正常人食管上皮組織制備。正常人食管組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應(yīng)用： <>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
技術(shù)傳授:
凍存培養(yǎng)基
人食管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)凍存細(xì)胞時必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含0% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至0分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  °C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
以下是人食管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)的相關(guān)產(chǎn)品：

APOA4 / Apolipoprotein A-IV 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

COX5B 抗體, 兔單抗 ELISA   FCM    50 µg

CXCL3 / GRO gamma 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IP   50 µg

AKRB 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

SIRP alpha / CD72a 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

SerpinI2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

MESDC2 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IP   50 µg

SH2DA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

RAB5A 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

人食管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)三溴甲砜分子式：392.89英文名稱：Three methyl bromide：7025-47-7分子量： C7H5Br3O2S

2-甲-4-硝氧吡分子式：54.2英文名稱：2- methyl -4- nitro pyridine：5470-66-6分子量： C6H6N2O3

三溴氫4-二甲吡復(fù)合物分子式：362.89英文名稱：Three 4- two a group of amino pyridine：92976-8-3分子量： C7HBr3N2

2,2',3,3',5,5',6,6'-八氟聯(lián)分子式：298.3英文名稱：2,2', 3,3', 5,5', 6,6'- eight：3883-86-分子量： C2H2F8

2,4-滴異辛酯英文名稱：2,4- drops of isooctyl分子式：333.25分子量： C6H22Cl2O3：2568-26-7

雙(二異丙)(2-乙氧)膦英文名稱：Double (two isopropyl amino (2-) - ethoxy) phosphine分子式：30.4分子量： C5H32N3OP：0269-36-

腈唑分子式：336.82英文名稱：Benzene, benzene：4369-43-6分子量： C9H7ClN4

間三氟酚分子式：62.英文名稱：Between three f：98-7-9分子量： C7H5F3O

2--3-甲-5-氯吡半水合物分子式：303.9英文名稱：2- -3- -5- methyl chloride：7309-45-8分子量： C2H6Cl2N4O

草氨酸鉀分子式：27.4英文名稱：Potassium potassium：24-3-分子量： C2H2KNO3

細(xì)胞可重發(fā)跟不可重發(fā)：
可以重發(fā)的情況有哪些？
（）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細(xì)胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
人食管上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；