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DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品：ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 小鼠心肌細(xì)胞MCM EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 ACTE1 非洲爪蟾胚胎細(xì)胞
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 DLD 1; DLD1; CoCL3
種屬 人類
年齡（性別） 成人
組織來源 結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
DLD-1細(xì)胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細(xì)胞與HCT-15細(xì)胞相似，說明這兩者是來自同一個(gè)人的不同克隆。DLD-1細(xì)胞和HCT-15細(xì)胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實(shí)，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)，p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p53抗原產(chǎn)生了一個(gè)C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1 |
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~24-48小時(shí)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表達(dá)情況 Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re
基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠蛋白激酶C epsilon(PKCε)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PKCε ELISA Kit
Porcine von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)檢測(cè)試劑盒
病毒H9亞型核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLp-PL-A2(Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit人脂蛋脂酶A2
通用細(xì)胞/組織載玻片制備試劑盒20次
ELISAKitPRL雞催乳素
HA重組甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
P63 protein P63 抑制基因(抗原 0.5mgP63 protein P63 抑制基因(抗原)
CR2重組人 CD21 / CR2 / C3DR 蛋白 Protein
CBR3 Protein Human 重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白
ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
P63 protein P63 抑制基因(抗原 0.5mgP63 protein P63 抑制基因(抗原)
CBR3 Protein Human 重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白
HA重組甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CR2重組人 CD21 / CR2 / C3DR 蛋白 Protein
DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai reticulin aibody (ARA) ELISA Kit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)檢測(cè)試劑盒
Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA-IgG(Humanai-cardiolipinaibodyIgG)ELISAKit人抗心0脂抗體IgG
藥品乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKit小鼠骨保護(hù)素(OPG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
血液DNA大量提取試劑盒 5T
BloodDNAMaxiKit 10T
血液RNA試劑盒 50T
BloodRNAKit 100T
