HCT-15 (人結(jié)直腸腺癌細胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！

商品詳情：

別稱 HCT-15; HCT15

種屬 人類

年齡（性別） 男性

組織來源 結(jié)直腸腺癌

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述：DNA指紋鑒定證據(jù)表明，HCT-15細胞和DLD-1細胞來源于同一個人；但同工酶及細胞染色體組型分析仍存疑問。HCT-15細胞呈CSAp陰性(CSAp-)；HCT-15角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~20-25小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 5.4 ng/10^6 cells/10 days. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠彈性蛋白(ELN)檢測試劑盒 ，英文名： ELN ELISA Kit

Porcine thrombomodulin (TM) ELISA Kit 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)檢測試劑盒

ELISA 小鼠雄激素結(jié)合蛋白(mouse ABP)  進口分裝

CLIAKitforLPO(Humanlipidperoxlde)ELISAKit人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶

通用細胞載玻片制備試劑盒50次

ELISAKitLH雞促黃體激素

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白介素2(IL2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)

CKB重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標簽)

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標簽)

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein

CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標簽)

MFGE8重組人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein

HCT-15 (人結(jié)直腸腺癌細胞)小鼠脂多糖(LPS)檢測試劑盒 96T/48T

Human ai hepatitis B virus core aibody (HBcAb) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)檢測試劑盒

HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAAA(Humanai-albuminaibody)ELISAKit人抗白蛋白抗體

中和液100毫升

MouseneuropeptideY,NP-YELISAKit小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

血栓前體蛋白   英文名稱：   thrombus precursor protein   規(guī)格：      英文縮寫：   TpP

可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1   英文名稱：   soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1   規(guī)格：      英文縮寫：   sEM-1

胸苷酸合成酶   英文名稱：   thymidylate syhase   規(guī)格：      英文縮寫：   TS

敏感蛋白-1   英文名稱：   thrombospondin 1   規(guī)格：      英文縮寫：   TSP-1